Православная Церковь считает этот день важной частью подготовки к Пасхе, празднованию Воскресения Христова. В Великий или, как его еще называют, Чистый Четверг все православные верующие традиционно приходят в храм на богослужение, за которым приступают к Святым Христовым Тайнам.
Богослужение Четверга начинается с утрени, во время которой после шестопсалмия и «Аллилуия» поется тропарь: «Егда славнии ученицы на умовении Вечери просвещахуся...». В этот день совершается Литургия святителя Василия Великого и соединяется с вечернею в память того, что Господь установил вечером Таинство Причащения. Вместо Херувимской песни, причастного стиха и песни: «Да исполнятся уста наша...», поется одна и та же песнь: «Вечери Твоея тайныя днесь, Сыне Божий, причастника мя приими...».
В этот день Святейший Патриарх совершает освящение мира, употребляемого для совершения Таинства Миропомазания, при освящении храмов и антиминсов.
Во все времена к Великому Четвергу верующие готовились особенно, в Российской Империи этот день был выходным. В Чистый Четверг принято наводить порядок в доме, ходить в баню, а также готовиться к праздничной пасхальной трапезе.